O DRAQ7 tem muitas aplicações e é altamente compatível com os protocolos existentes em uma ampla gama de plataformas de instrumentação.

  • Marcação rápida de dsDNA/núcleos de células mortas ou permeabilizadas
  • Combinação com corantes de células vivas para discriminação morta/viva
  • Fácil de usar - sem lavagem, sem necessidade de RNase
  • Ideal para uso com marcadores GFP & FITC - DRAQ7 fluoresce na região de far-red
  • DRAQ7 é um contraste ideal de DNA far-red para IF/IHC, rastreio de conteúdo elevado e ensaios baseados em células

Características Espectrais:

  • Emissão de fluorescência a partir de 665 nm até o infravermelho baixo
  • Os melhores filtros de emissão sugeridos incluem 695LP, 715LP ou 780 LP
  • Oticamente compatível com citotomos de varredura de fluxo e a laser de bancada e com microscópios confocais epifluorescentes e não-UV
  • Excitação útil em comprimentos de onda subótimos a partir das linhas de 488 nm, 568 nm e 633 nm, mais excitação ótima de 647 nm. Nenhuma excitação por UV, ao contrário do iodeto de propídio.
  • Não é necessária compensação com combinações comuns FITC/GFP + PE em citometria de fluxo. Pode ser combinado com muitos corantes para células vivas.
  • Permite a multi-linha de imagens/citometria quando combinado com fluorocromos UV e vis.
  • Nenhum aumento de fluorescência aparente após ligação ao DNA
  • Foto branqueamento não observado normalmente

Excitação:

  • 633 & 647 nm linha ótima (Exλmax 599/644 nm)
  • 488, 514 e 568, subótimas (apenas por citometria de fluxo)

Emissão:

  • > 665 nm a infravermelho > 800 nm (Emλmax 678 nm/694 nm intercalado com dsDNA)
  • Mínima sobreposição com alcance visível, p. ex., GFP e FITC
  • Os filtros de emissão podem incluir 695LP, 715LP, 725 BP 20 ou 780 LP

O DRAQ7 entra e marca somente células comprometidas com membrana.

Os dados citométricos de fluxo abaixo mostram apoptose (membranas comprometidas que permitem a entrada de DRAQ7) de células Jurkat humanas expostas a estaurosporina 0,1 a 2,0 μM durante 24h em comparação com controles negativos.

O DRAQ7 pode ser utilizado em análises de citometria de fluxo para marcar células comprometidas pela membrana, em combinação com reagentes tais como Anexina V, sondas de membrana mitocondrial e outros repórteres de saúde celular. Os corantes de DNA impermeáveis de células intactas vivas são comumente combinados com Anexina V (que descreve a inversão de membrana) para dar informação sobre a progressão da apoptose. Conforme mostrado na figura abaixo, o DRAQ7 (series de topo e média) desempenha de forma equivalente ao iodeto de propídio (PI, série de fundo), para relatar o início do vazamento de membrana causado por doses crescentes de VP-16. Além disso, o DRAQ7 oferece novas possibilidades como um vermelho far-red, não-reforçando corante ligado ao DNA. Utilizando indicadores log e lineares, podem ser identificadas outras subpopulações discretas. Além disso, ao contrário do PI, o DRAQ7 permitirá que vários parâmetros fluorescentes sejam medidos em paralelo; 4 com excitação azul do laser.

O DRAQ7 pode ser utilizado em ensaios de apoptose, ensaios de citotoxicidade, testes de anticorpos citolíticos, ensaios de saúde celular.

Devido ao seu sinal de emissão far-red, o DRAQ7 pode ser facilmente combinado com vários outros fluoróforos; até 4 usando a única fonte de excitação de 488 nm (laser de íon argônio).